产品货号:
GS2245
中文名称:
柱式PCR产物纯化试剂盒
英文名称:
SD-10 Spin Column PCR Product Purification Kit
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒采用特殊的硅胶吸附膜,特定的Binding Buffers存在条件下可选择性地吸附最高10μg的DNA片段,对核酸、酶、矿物油和其它杂质无吸附性。DNA片段可被小体积的Elution Buffer充分洗脱。
- 从PCR反应体系中回收PCR产物。
- 从反应液中回收DNA片段。
- 快速且经济。整个过程只需要15~20minutes。
- 回收率高(60~90%)。适用于回收100bp~10kb的DNA片段,对于10kb~40kb的DNA片段,回收率只有30~50%。
- 有效除去污染物。纯化的DNA可用于测序、标记、酶切、连接、转化和其他后续分子生物学实验。
- 无需苯酚/氯仿抽提和乙醇沉淀。
组分 | 50T | 100T |
Binding Buffer III | 24mL | 48mL |
Wash Solution | 12mL | 24mL |
Elution Buffer | 5mL | 10mL |
SD-10吸附柱及收集管(2mL) | 50套 | 100套 |
保存:室温
- 使用前,12mL Wash Solution中应加入48mL无水乙醇,24mL Wash Solution中应加入96mL无水乙醇。如果Wash Solution的体积由于运输过程泄漏而不足12mL或24mL,需要重新测量其体积,并确定需要加入多少ml的无水乙醇(无水乙醇:Wash Solution=4:1)。
- Elution Buffer为2mM Tris-HCl,pH8.0~8.5。虽然也能使用TE buffer pH8.0或者水替代,但回收率通常会减少20%左右。
- 使用前,Binding buffer III中应加入6mL或12mL异丙醇。
- Elution Buffer或TE buffer或ddH2O于60℃温浴可提高回收效率。
- 为能够充分洗脱,请在清洗步骤后将SD-10吸附柱室温静置10min或50℃烘箱烘干5min,使残留的乙醇彻底挥发。
- 如果PCR反应液中含有严重的非特异性扩增片段,推荐使用DNA Gel Extraction Kit。
- 本试剂盒无法去除链长大于50-mer的模板和引物。
一、PCR产物纯化步骤
- 将PCR反应液转移到1.5mL离心管,加入5倍体积的Binding Buffer III。
- 将SD-10吸附柱放入2mL收集管中。将上述混合液转移至吸附柱,室温静置2min。8000rpm离心1min。
- 倒掉收集管中的液体。加入500μL Wash Solution到SD-10吸附柱,10000×g离心1min。倒掉收集管中的液体,并将SD-10吸附柱放回原来的收集管中。
- 加入500μL Wash Solution到SD-10吸附柱中,10000×g离心1min。倒掉收集管中的液体,再离心一次以除去残留的Wash Solution。
- 将SD-10吸附柱放入一个干净的1.5mL离心管中。在吸附膜中央加入30~50μL Elution Buffer或水,50℃孵育2min。10000×g离心1min。PCR产物可直接用于后续实验或保存于-20℃。
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